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Concept
Immunohistochimie
Résumé
thumb|Axones dans un ganglion de souris, vue par immunofluorescence.
L'immunohistochimie (IHC) est une méthode de localisation de protéines dans les cellules d'une coupe de tissu, par la détection d'antigènes au moyen d'anticorps.
L'immunohistochimie exploite le fait qu'un anticorps se lie spécifiquement à des antigènes dans les tissus biologiques. Les anticorps peuvent être d'origine polyclonale ou monoclonale, les anticorps monoclonaux étant plus spécifiques par essence.
L'immunohistochimie tire son nom de la racine « immuno », en référence à l'anticorps utilisé dans la procédure, du mot « chimie » et du mot « histologie » qui évoque l'étude de tissus biologiques (à comparer à l'immunocytochimie).
Un couple anticorps-antigène peut être visualisé de plusieurs façons. Dans la plupart des cas, l'anticorps est conjugué à une enzyme (ex : peroxydase) qui peut catalyser une réaction de production de couleur ( coloration immunoperoxydase). Les anticorps peuvent aussi être marqués par un fluorochrome ( FITC, Rhodamine, Texas Red ou Alexa Fluor) : voir immunofluorescence.
L'immunohistochimie est largement utilisée pour le diagnostic et/ou le suivi de cancers par détection de cellules anormales telles que celles trouvées dans les tumeurs cancéreuses.
Des marqueurs spécifiques sont ainsi aujourd'hui connus pour divers cancers :
antigène carcino-embryonnaire (CEA) : utilisé en cas de cancer du côlon ;
CD15 et CD30 : utilisés pour la maladie de Hodgkin ;
alpha-fœtoprotéine : en cas de carcinome hépatocellulaire ;
CD117 : en cas de tumeur stromale gastro-intestinale ;
Ki-67 : un des indices de prolifération tumorale.
Ces marqueurs moléculaires sont caractéristiques de certains événements cellulaires tels que la prolifération ou la mort cellulaire (apoptose).
L'IHC est aussi largement utilisée en recherche fondamentale pour comprendre la distribution et la localisation de biomarqueurs et de protéines différentiellement exprimés dans les différentes parties d'un tissu biologique.
Le tissu est placé sur un support solide.
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Transfert de protéines
Le transfert de protéines, en anglais western blot (également appelé buvardage de western ou encore technique des immuno-empreintes), est une méthode de biologie moléculaire permettant la détection et l'identification de protéines spécifiques dans un échantillon biologique (sérum ou autre extrait ou homogénat tissulaire) à l'aide d'anticorps dirigés contre ces protéines que l'on souhaite détecter. Le western blot permet ainsi de visualiser des protéines particulières dans un mélange complexe.
Primary and secondary antibodies
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Immunostaining
In biochemistry, immunostaining is any use of an antibody-based method to detect a specific protein in a sample. The term "immunostaining" was originally used to refer to the immunohistochemical staining of tissue sections, as first described by Albert Coons in 1941. However, immunostaining now encompasses a broad range of techniques used in histology, cell biology, and molecular biology that use antibody-based staining methods.