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Concept
Cosmide
Résumé
Un cosmide est un vecteur artificiel constitué d'un plasmide hybride contenant la séquence cos du phage lambda. Le nom « cosmide » est un mot-valise formé à partir de cos et plasmide. Les cosmides sont fréquemment utilisés comme vecteurs de clonage en génie génétique, et employés pour construire des banques génomiques. Ils ont été initialement décrits par Collins et Hohn en 1978.
vignette|440x440px|Schéma illustrant un clonage d'ADN dans un vecteur cosmidique.
Les cosmides peuvent contenir de 37 à 52 (en moyenne 45) kb d'ADN, limites basées sur la taille normale de ce que contient la capside des bactériophages. Ils peuvent se répliquer sous forme de plasmides s'ils ont une origine de réplication (ori) appropriée : par exemple ori SV40 dans les cellules de mammifères, ori ColE1 pour la réplication de l'ADN double brin, ou ori f1 pour la réplication de l'ADN simple brin chez les procaryotes. Ils contiennent aussi souvent un gène de sélection, comme la résistance aux antibiotiques, de sorte que les cellules transformées peuvent être identifiées par étalement sur un milieu solide contenant l'antibiotique. Les cellules qui n'ont pas absorbé le cosmide seront ainsi incapables de se développer. Les bactéries transfectées avec des cosmides forment des colonies, et non des plaques. On obtient après sélection environ 105-106 UFC par μg d'ADN lié.
Contrairement aux plasmides, ils peuvent également être encapsidés in vitro dans des capsides de phage, une étape qui nécessite des extrémités cohésives, également connues sous le nom de sites cos, également utilisées dans le clonage avec un phage lambda comme vecteur, cependant dans ce cas presque tous les gènes lambda ont été supprimés à l'exception de la séquence cos. L'ADN cosmide hybride des capsides peut alors être transféré dans les cellules bactériennes par transduction. Comme il existe une exigence d'empaquetage in vitro selon laquelle au moins 38 kb d'ADN sont nécessaires entre les sites cos, le vecteur sans ADN inséré ne sera pas encapsidé.
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