GelRedGelRed is an intercalating nucleic acid stain used in molecular genetics for agarose gel DNA electrophoresis. GelRed structurally consists of two ethidium subunits that are bridged by a linear oxygenated spacer. GelRed is a fluorophore, and its optical properties are essentially identical to those of ethidium bromide. When exposed to ultraviolet light, it fluoresces with an orange color that strongly intensifies after binding to DNA. The substance is marketed as a less toxic and more sensitive alternative to ethidium bromide.
Électrophorèse bidimensionnelleTwo-dimensional gel electrophoresis, abbreviated as 2-DE or 2-D electrophoresis, is a form of gel electrophoresis commonly used to analyze proteins. Mixtures of proteins are separated by two properties in two dimensions on 2D gels. 2-DE was first independently introduced by O'Farrell and Klose in 1975. 2-D electrophoresis begins with electrophoresis in the first dimension and then separates the molecules perpendicularly from the first to create an electropherogram in the second dimension.
PolyacrylamideLe polyacrylamide est un polymère répondant à la formule [-CH2-CH(-CONH2)-], formé à partir d'acrylamide. Il peut être réticulé en incorporant dans le mélange de polymérisation un dérivé bifonctionnel de l'acrylamide : le N,N'-méthylène-bis-acrylamide (CH2=CH-CO-NH-)2CH2. Le polyacrylamide, contrairement à l'acrylamide qui est neurotoxique, n'est pas toxique mais doit être manipulé avec précaution car il peut contenir des traces de monomère acrylamide. Le polyacrylamide est un gel hautement absorbant.
Marqueur de poids moléculaireUn marqueur de poids moléculaire est une solution de molécules d'ADN ou de protéines servant à déterminer le poids moléculaire de fragments d'ADN ou de protéine. Ils sont couramment utilisés dans les différents types d'électrophorèse (en gel d'agarose, gels SDS-PAGE, etc.). Ce marqueur sert de référence pour estimer la taille (inconnue) des molécules d'intérêt. Les molécules présents dans le mélange utiliser, en général industriel, doit présenter des molécules de même nature que celle que l'on souhaite étudier (protéines, ADNdb, ADNsb.
Purification des protéinesLa purification des protéines est une série de processus divers destinés à isoler une ou plusieurs protéines à partir d'un mélange complexe (cellules, autres particules ou matrices). C'est une étape importante en recherche fondamentale pour la caractérisation de la fonction (études des propriétés), de la structure, sa composition en acide aminé et des interactions d'une protéine d'intérêt, mais aussi en recherche appliquée et industrie pour préparer des matières et réactifs.
Violet de gentianeLe nom violet de gentiane est le nom commun donné au mélange de méthyl violets 2B, 6B et 10B selon que la molécule contient 4, 5 ou 6 groupements méthyle. On appelle parfois cristal violet ou violet de Paris le méthyl violet 10B, tandis que le méthyl violet 2B est connu en tant que violet de méthyle. C'est un colorant de couleur violette, d'autant plus foncée que le nombre de groupements méthyle augmente, utilisé surtout en microbiologie : dans la coloration de Gram ; dans certains milieux sélectifs (par exemple, dans la gélose de Drigalski comme inhibiteur des bactéries à Gram positif).
Northwestern blotThe northwestern blot, also known as the northwestern assay, is a hybrid analytical technique of the western blot and the northern blot, and is used in molecular biology to detect interactions between RNA and proteins. A related technique, the western blot, is used to detect a protein of interest that involves transferring proteins that are separated by gel electrophoresis onto a nitrocellulose membrane. A colored precipitate clusters along the band on the membrane containing a particular target protein.
Mutagénèse dirigéeLa mutagénèse dirigée est l'induction d'une ou plusieurs mutations dans un génome, de façon précise et volontaire. Cette méthode est employée pour modifier les structures de l'ADN, l'ARN et des protéines. Cette technique de biologie moléculaire a été mise au point par Michael Smith en 1978. Apparemment, l’idée de la mutagénèse dirigée lui serait venue au cours d’une conversation avec Clyde Hutchison en 1976 à l’institut de Cambridge en Angleterre, alors qu’il travaillait sur la préparation d’oligonucléotides pour purifier des fragments d’ADN.
Bleu de Coomassie brillantLes bleus de Coomassie brillants sont deux composés organiques à structure triphénylméthane employés comme colorants textiles (applications industrielles) et en biochimie pour les protéines. En se liant aux protéines ils permettent de les doser en solution par colorimétrie (méthode dite de Bradford) et de les visualiser sur les gels d'électrophorèse (par exemple en SDS-PAGE).
Extraction d'ADNL'extraction de l'ADN est une technique permettant d'isoler l'acide désoxyribonucléique (ADN) des cellules ou des tissus. L'ADN ainsi extrait peut ensuite être utilisé pour des recherches de biologie moléculaire, telles que le séquençage, la PCR ou le clonage. Il existe différents protocoles pour extraire l'ADN, qui suivent approximativement le même schéma de principe : Lyse des cellules Elimination des protéines Elimination des autres acides nucléiques (acide ribonucléique (ARN), etc.
