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Concept
Étiquette poly-histidine
Résumé
Une étiquette poly-histidine est un motif d'acides aminés dans une protéine constitué d'au moins six résidus histidine, souvent insérés à l’extrémité N- ou C- terminale de la protéine. On la désigne parfois par les noms hexa-histidine tag (en anglais), 6xHis-tag ou encore la marque déposée His-tag de EMD Biosciences.
Elle est fréquemment utilisée pour la purification par chromatographie d'affinité de protéines synthétisées par génie génétique.
Cette étiquette a été inventée par le laboratoire Roche mais les histidines et leurs vecteurs sont maintenant distribués par Qiagen. Divers kits de purification pour les protéines marquées par l'histidine sont disponibles chez Qiagen, Sigma-Aldrich Corporation, Thermo Scientific, GE Healthcare, entre autres.
L'étiquette peut être utilisée sans restriction pour la recherche académique, en revanche les personnes désirant en faire une utilisation commerciale doivent payer une redevance à Roche. Le brevet original a expiré le , et relève par conséquent du domaine public, les demandes de redevances actuelles étant basées sur un ensemble de brevets beaucoup plus restreint.
Il existe des étiquettes adaptées pour une utilisation commerciale gratuite, telles que le MK(HQ)6 qui peut être employé pour améliorer l'expression chez E.coli. Les différentes étiquettes disponibles varient selon le nombre de résidus histidine, ainsi que par la présence d'éventuels peptides greffés à la suite de l'étiquette histidine. Ceux-ci permettent de supprimer facilement l'étiquette à l'aide d'une endopeptidase. Autrement, des exopeptidases peuvent être utilisées pour retirer les étiquettes His-tags N-terminales (par exemple, pour le TAGZyme de Qiagen). Le clivage par exopeptidase a l'avantage d'être plus spécifique, évitant ainsi la dégradation accidentelle de la protéine d'intérêt.
Les étiquettes poly-histidines sont utilisées pour purifier des protéines recombinantes, en général produites par E. coli ou par d'autres procaryotes.
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