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Cette séance de cours couvre les facteurs influençant la séparation en HPLC, tels que les propriétés de l'éluant et les critères d'optimisation. Il traite de l'influence des phases stationnaires, des solutés et des aspects physiques de la colonne sur la résolution et la capacité de pointe. La séance de cours explore également l'impact de la température sur les performances de la colonne, la distribution granulométrique et l'utilisation de différents solvants dans l'éluant. Il approfondit les pics chromatographiques obtenus dans diverses conditions et l'importance de la pression, de la température et des propriétés chimiques de l'éluant dans la réalisation d'une séparation optimale.