Êtes-vous un étudiant de l'EPFL à la recherche d'un projet de semestre?
Travaillez avec nous sur des projets en science des données et en visualisation, et déployez votre projet sous forme d'application sur Graph Search.
Concept
Coloration Hoechst
Résumé
vignette|300x300px|Structure chimique du colorant Hoechst.
Les colorants Hoechst font partie de la famille des colorants à l'aide de marqueurs fluorescents utilisés pour marquer l'ADN. Ces composés, de la famille des bisbenzimides, ont été initialement développés par Hoechst AG qui numérotait ses créations. Ainsi, le est le composé développé par cette entreprise. Il existe trois composés similaires de coloration de l'ADN : le , le et le . Les colorants et sont les plus fréquents et possèdent des spectres d'excitation/émission similaires. Le a une perméabilité cellulaire dix fois plus grande que le H33258.
vignette|300x300px|Spectre d'excitation/émission des colorants de type Hoechst.
Les deux composés s'excitent à l'aide de rayons ultraviolet à une longueur d'onde autour de , ils émettent tous deux une lumière bleu-cyan par fluorescence. La longueur d'onde d'émission maximum est à . Lorsqu'il est non-lié, le colorant émet son maximum de fluorescence entre 510 et . La coloration Hoechst peut être excitée par une lampe à xénon ou une lampe à vapeur de mercure ou par un laser UV. Le déplacement de Stokes entre le maxima d'excitation et d'émission rend la coloration Hoechst très utile dans des expériences où un grand nombre de fluorophores sont utilisés. L'intensité de fluorescence de la coloration Hoechst augmente avec le pH du solvant.
Les colorants Hoechst sont soluble dans l'eau et dans les solvants organiques comme le diméthylformamide ou le diméthylsulfoxide. On peut obtenir des solutions jusqu'à une concentration de . Les solutions aqueuses sont stable plus de six mois si stockées entre 2 et et protégées de la lumière. Pour des conservations plus longues, les solutions sont congelées à une température inférieure à .
vignette|300x300px|Hoechst 33258 (magenta) lié au petit sillon de l'ADN (bleu et vert). Source : PDB 264D.
Le colorant se fixe au niveau du petit sillon du double-brin d'ADN avec plus d'affinité pour les séquences riches en adénine et thymine. Une fixation sur ces séquences riches en AT augmente considérablement la fluorescence obtenue.
Source officielle
À propos de ce résultat
Cette page est générée automatiquement et peut contenir des informations qui ne sont pas correctes, complètes, à jour ou pertinentes par rapport à votre recherche. Il en va de même pour toutes les autres pages de ce site. Veillez à vérifier les informations auprès des sources officielles de l'EPFL.