Le glucose-6-phosphate est un composé organique abondant dans les cellules vivantes dans la mesure où l'essentiel du glucose qui pénètre dans une cellule est phosphorylé sur son carbone 6. Il s'agit d'un métabolite de départ tant pour la glycolyse que pour la voie des pentoses phosphates, et il peut également être converti en glycogène ou en amidon pour être stocké. {| align="left" |- align="center" valign="middle" | 100px | + ATP → ADP + | 110px |- align="center" valign="middle" | Glucose | | Glucose-6-phosphate |- align="center" valign="middle" | colspan="3" bgcolor="ffffd0" | Hexokinase – |} Cette réaction nécessite un cation Mg2+ comme cofacteur et consomme une molécule d'ATP pour phosphoryler chaque molécule de glucose. Elle contribue à maintenir la concentration en glucose relativement basse dans le cytoplasme afin de faciliter l'entrée de molécules de glucose supplémentaires. De surcroît, le glucose-6-phosphate ne peut plus quitter la cellule, car la membrane plasmique n'a pas de transporteur pour cette molécule. Selon les circonstances, ce glucose-6-phosphate peut connaître plusieurs destinées : si le glucose-6-phosphate et l'ATP sont abondants, le glucose-6-phosphate est mis en réserve sous forme de glycogène par la glycogénogenèse ; s'il manque de l'ATP et des squelettes carbonés pour les biosynthèses, le glucose-6-phosphate est dégradé par la glycolyse ; s'il manque du NADPH + H+ et du ribose-5-phosphate, le glucose-6-phosphate est dégradé par la voie des pentoses phosphates. redresse=1.5|centre|vignette|Synthèse du glucose-6-phosphate par une hexokinase à partir de glucose. {| align="left" |- align="center" valign="middle" | 100px | | 150px |- align="center" valign="middle" | Glucose-6-phosphate | | Fructose-6-phosphate |- align="center" valign="middle" | colspan="3" bgcolor="ffffd0" | Glucose-6-phosphate isomérase – |} L'α-D-glucose-6-phosphate est isomérisé en β-D-fructose-6-phosphate par la glucose-6-phosphate isomérase.

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